显微镜的使用

 

　　利用自然光源镜检时，最好用朝北的光源，不宜采用直射阳光；利用人工光源时，宜用日光灯的光源。

 

　　镜检时身体要正对实习台，采取端正的姿态，两眼自然张开，左眼观察标本，右眼观察记录及绘图，同时左手调节焦距，使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。

 

　　镜检时载物台不可倾斜，因为当载物台倾斜时，液体或油易流出，既损坏了标本，又污染载物台，也影响检查结果。

 

　　镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检，不重复。

 

　　显微镜的重光为对光，接物镜的转换及光线的调节。观察寄生虫标本时，光线调节甚为重要。因为所观察的标本如虫卵、包囊等，均为自然光状态的物体，有大有小，色泽有深有浅，有的无色透明，而低倍、高倍接物镜转换较多，故须随着镜检时对不同标本和要求，需要随时调节焦距和光线，这样才能使观察的物象清晰。在一般情况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜观察光线宜强。

 

　　1．对光：

 

　　（1）将低倍镜转至镜筒下方与镜筒成一直线。

 

　　（2）拨动反光镜，调节至视野最亮无阴影。反光镜有平、凹两面，光源强时用平面，较暗时用凹面，需要强光时，将聚光器提高，光圈放大；需要弱光时，将聚光器降低，或光圈适当缩小。

 

　　（3）将待观察的标本置载物台上，转动粗调节器使镜筒下降至接物镜接近标本。于转动粗调节器的同时，须俯身在镜旁仔细观察接物镜与标本之间的距离。

 

　　（4）左眼于接目镜观察，同时左手转动粗调节，使镜筒徐徐上升以调节焦距，使视野内的物象看到上时即停，再调微调节器，至标本清晰为止。

 

　　2．接物镜的使用及光线的调节：

 

　　显微镜一般具有三个接物镜，即低倍、高倍及油镜，固定于接物镜转换盘孔中。观察标本时，先使用低倍接物镜，此时，视野较大，标本较易查出，但放大倍数较小（一般放大100倍），较小的物体不易观察其结构。高倍接物镜放大的倍数较大（一般放大400倍），能观察微小的物体或结构。

 

　　寄生虫的蠕虫卵，微丝蚴，原虫的滋养体及包囊，昆虫的幼虫，均使用低、高倍镜。组织细胞内的原虫，则使用油镜。使用低、高倍镜观察，如在低倍镜下不能准确鉴定所见的物体或其内部构造时，则转高倍镜观察。使用油镜观察，一般加一滴油后直接将油镜头浸入油滴中进行镜检观察。

 

　　3．低倍、高倍、油镜头的识别：

 

　　（1）标明放大倍数10×，40×，100×，或10/0.25，40/0.65，100/1.25。

 

　　（2）低倍镜最短，高倍镜较长，油镜最长。

 

　　（3）镜头前面的镜孔低倍镜最大，高倍镜较大，油镜最小。

 

　　（4）油镜头上常刻有黑色环圈，或“油”字。

 

　　4．低倍镜换高倍镜的使用方法：

 

　　（1）光线对好后，移动推进器寻找需要观察的标本。

 

　　（2）如标本的体积较大，不能清楚查见其构造因而不能确认时，则将标本移至视野中央，再旋转高倍接物镜于镜筒下方。

 

　　（3）旋转微调节器至物象清晰为止。

 

　　（4）调节聚光器及光圈，使视野内的物象达到最清晰的程度。

 

　　5．油镜的使用方法：

 

　　（1）原理：使用油镜观察时，需加香柏油，因为油镜需要进入镜头的光线多，但油镜的透气孔最小，这样进入的光线就少，物体不易看清楚。同时又因自玻片透过的光线，由于介质（玻片－空气－接物镜）密度（玻片：n=1.52，空气：n=1.0）不同而发生了折射散光，因此射入镜头的光线就更少，物体更看不清楚。于是采用一种和玻片折光率相接近的介质如香柏油，加于标本与玻片之间，使光线不通过空气，这样射入镜头的光线就较多，物象就看得清楚。

 

　　（2）油镜的使用：

 

　　a．将光线调至最强程度（聚光器提高，光圈全部开放）。

 

　　b．转动粗调节器使镜筒上升，滴香柏油1小滴（不要过多，不要涂开）于接物镜正下方标本上。

 

　　c．转动接物镜转换盘，使油镜头于镜筒下方。

 

　　d．俯身镜旁侧面在肉眼的观察下，转动粗调节器使油镜头徐徐下降浸入香柏油内，轻轻接触玻片为止。

 

　　e．慢慢转动粗调节器，使油镜头徐徐上升至见到标本的物象为止。

 

　　f．转动微调节器，使视野物象达到最清晰的程度。

 

　　g．左手徐徐移动推进器，并转动微调节器以观察标本。

 

　　h．标本观察完毕后，转动粗调节器将镜筒升起，取下标本玻片。立即用擦镜纸将镜头上的香柏油擦净。

 

　　6．注意事项：

 

　　（1）使用显微镜之前，应熟悉显微镜的各部名称及使用方法，特别应掌握识别三种接物镜之特征。

 

　　（2）寄生虫学实习中所观察的标本，大多数为无色和颜色较浅，因此必须注意光线的调节。

 

　　（3）新鲜标本观察时，须加盖玻片，以免标本因蒸发而干燥变形或污染侵蚀接物镜，同时可使标本表面匀平，光线得以集中，有利于观察。

 

　　（三）显微镜的保养

 

　　图3加用盖玻片后，标本表面匀平，光线得以集中，便于检查示意图

 

　　1．显微镜在从木箱中取出或装箱时，右手紧握镜臂，左手稳托镜座，轻轻取出。不要只用一只手提取，以防显微镜坠落，然后轻轻放在实习台上或装入木箱内。

 

　　2．显微镜放到实习台上时，先放镜座的一端，再将镜座全部放稳，切不可使镜座全面同时与台面接触，这样震动过大，透镜和微调节器的装置易损坏。

 

　　3．显微镜须经常保持清洁，勿使油污和灰尘附着。如透镜部分不洁时，用擦镜纸轻擦，如有油污，先将擦镜纸蘸少许二甲苯拭去。

 

　　4．显微镜不能在阳光下暴晒和使用。

 

　　5．接目镜和接物镜不要随便抽出和卸下必须抽取接目镜时，须将镜筒上口净用布遮盖，避免灰尘落入镜筒内。更换接物镜时，卸下后应倒置在清洁的台面下，并随即装入木箱的置放接物镜的管内。

 

　　6．显微镜用完后，取下标本片，经聚光器降下，再将物镜转成“八”字形，转动粗调节器使镜筒下降，以免接物镜与聚光器相碰。

 

　　7．显微镜应放在干燥的地方，以防生霉。

 

　　二、体视显微镜的使用

 

　　体视显微镜能获得立体感觉，其原理是由于通过两个接目镜对物体从不同的方向在人眼的网膜上形成的象而产生的。本显微镜具有倾斜成45°的双筒，通过双筒可以观察到宽广视野中正立的具有立体感的物象。其中右侧接目镜筒上有视度调节圈的位置，如观察者双眼视度具有差异，可以先调节显微镜使左眼成像清晰，然后旋转右侧视度调节圈至右眼成像清晰。双筒可以在一定角度内相对地转动以适应工作者两眼间距离。本显微镜的工作距离为100mm，在方形镜身两侧有手轮可旋转，利用它的转动可在不变更工作距离情况下更换显微镜放大倍数。显微镜总放大倍数的读数，在使用25×接目镜时，以右侧数盘上数字为准，而使用6.3×接目镜时，则以左侧数盘上的数字为准。

 

　　三、其它仪器器材的使用与保养

 

　　除显微镜、体视显微镜以外，寄生虫学实习课用的器材、仪器尚有许多，在此我们不一一赘述，每次实习课辅导教师将向我们介绍，这里仅将这些仪器、器材分类别略作一些使用原理的介绍。

 

　　（一）玻璃仪器、器材：使用时轻拿轻放，防止破碎，用毕应清洗干净、凉干、烘干以防生霉。

 

　　（二）金属仪器、器材：勿接触或少接触酸性、碱性物品，用毕应洗刷、擦净、凉干、烘干以防腐蚀生锈

 

　　低倍镜的使用方法

 

　　（1）取镜和放置：显微镜平时存放在柜或箱中，用时从柜中取出，右手紧握镜臂，左一手托住镜座,将显微镜放在自己左肩前方的实验台上，镜座后端距桌边7厘米为宜，便于操作。

 

　　（2）对光：用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动)，使低倍镜对准镜台的通光孔(当转动听到碰叩声时，说明物镜光轴已对准镜筒中心)。调节为较大光圈并将反光镜转向光源，左眼在目镜上观察(右眼睁开),同时调节反光镜偏转角度，直到视野内出现明亮光斑为止。

 

　　（3）放置玻片标本：取一玻片标本放在镜台上，一定使有盖玻片的一面朝上，切不可放反，用压片夹夹住，然后移动玻片，将所要观察的部位调到视野范围内。

 

　　（4）调节焦距：以左手按逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓慢地下降至物镜距标本片约5毫米处，应注意在下降镜筒时，切勿在目镜上观察。一定要从右侧看着镜筒下降，以免下降过多，造成镜头或标本片的损坏。然后，两眼同时睁开，用左眼在目镜上观察，左手顺时针方向缓慢转动细准焦螺旋，使镜筒缓慢下降，直到视野中出现清晰的物象为止。

 

　　如果物象不在视野中心，可移动玻片，将所要观察的部位调到视野范围内。(注意移动玻片的方向与视野物象移动的方向是相反的)。如果视野内的亮度不合适，可通过调整光圈的大小来调节，如果在调节焦距时，镜台下降已超过工作距离(>5.40mm)而未见到物象，说明此次操作失败，则应重新操作，切不可心急而盲目地上升镜台。

 

　　高倍镜的使用方法

 

　　（1）选好目标：一定要先在低倍镜下把需进一步观察的部位调到中心，同时把物象调节到最清晰的程度，才能进行高倍镜的观察。

 

　　（2）转动转换器，调换上高倍镜头，转换高倍镜时转动速度要慢，并从侧面进行观察(防止高倍镜头碰撞玻片)，如高倍镜头碰到玻片，说明低倍镜的焦距没有调好，应重新操作。

 

　　（3）调节焦距：转换好高倍镜后，用左眼在目镜上观察，此时一般能见到一个不太清楚的物象，可将细调节器的螺旋逆时针移动约0.5－1圈，即可获得清晰的物象(切勿用粗调节器!)

 

　　如果视野的亮度不合适，可用集光器和光圈加以调节，如果需要更换玻片标本时，必须顺时针(切勿转错方向)转动粗调节器使镜台下降，方可取下玻片标本。

 

　　想让像变大就要使物镜靠近物体,目镜远离物镜一些，像变小则反之。