1、化学发光标记免疫分析法

　　化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA),是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester(A E),是有效的发光标记物[3],其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2)作用而发光,强烈的直接发光在一秒钟内完成,为快速的闪烁发光(见图1)。吖啶酯作为标记物用于免疫分析,其化学反应简单、快速、无须催化剂;检测小分子抗原采用竞争法,大分子抗原则采用夹心法,非特异性结合少,本底低;与大分子的结合不会减小所产生的光量,从而增加灵敏度。

　　2、发光酶免疫分析法

　　从标记免疫分析角度,化学发光酶免疫分析(chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA),应属酶免疫分析,只是酶反应的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同[5]:以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体)进行免疫反应,免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光,用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP)和碱性磷酸酶(AL P),它们有各自的发光底物。