1.用输血器中进气器件将真空瓶口圆圈处穿透（进气器件应系紧防止漏气），再用瓶塞穿刺器旋转刺入瓶口。

　　2.打开连接管，一端与臭氧治疗仪出气口连接，另一端与针头连接后穿入真空瓶口十字处，注意一定要穿入瓶中管内。

　　3.将0.4毫升肝素钠用1毫升注射器注入真空瓶中备用，注意负压不能泄露，滴壶一定是负压状态。

　　4.对患者进行静脉穿刺。

　　5.用输血器将患者静脉血管中120ml～200ml左右血液快速（3分钟左右）吸引到负压瓶中并顺时针均匀摇（使肝素钠充分溶入血液中防止凝血）。

　　6.向真空瓶中缓慢注入200ml～400ml臭氧。用手握住瓶子顺时针均匀摇动1-2分钟，摇动中勿将血液流进连接管中，以免液体造成机器的损坏。打开流量调节器将臭氧化血液4分钟左右内输回患者体内，可以观察到此时的血液变鲜红。