以化学发光免疫分析法（CLIA）为例，试剂盒中的磁微粒包被有重组梅毒螺旋体抗原，样本中的抗体与之结合后，再加入带有化学发光标记物（如吖啶酯）的二抗，形成“抗原-抗体-标记二抗”三明治结构。在磁场作用下洗涤去除未结合物质后，加入启动液触发化学发光反应，光子信号由光电倍增管捕获并转化为相对光单位（RLU），其强度与样本中抗体浓度呈正相关。通过与预设的临界值（Cut-off）比较，即可判定结果为阳性或阴性。而胶体金法则是将抗原包被于检测线（T线），质控线（C线）包被抗鼠IgG等控制抗体，样本沿硝酸纤维素膜层析，若含特异性抗体，则与胶体金标记的抗人IgG/IgM结合，并在T线处被捕获显色，形成可见红线。

需特别指出，不同试剂盒所采用的抗原组合直接影响其敏感性和特异性。例如，使用多表位重组抗原（如Tp15+Tp17+Tp47）的试剂盒相较于单一抗原产品，可显著提升对早期或晚期梅毒的检出率，并减少交叉反应。此外，部分高端试剂盒引入双抗原夹心法（Double Antigen Sandwich Assay），可同时检测IgG和IgM，且不受类风湿因子等干扰物质影响，进一步提高检测准确性。