艾康血液血球分析仪的工作原理主要基于电阻抗法（Coulter Principle）与光散射技术的结合应用，部分高端型号还引入荧光染色或核酸荧光标记以增强白细胞亚群的分辨能力。在电阻抗法中，当稀释后的全血样本通过一个微孔传感器时，细胞因不导电而短暂取代电解质溶液，导致电极间电阻瞬时升高，产生与细胞体积成正比的电压脉冲信号。通过对脉冲数量与幅度的统计分析，可分别获得细胞计数与体积分布信息，此机制适用于红细胞、血小板及总体白细胞的检测。

对于白细胞五分类（即中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞），艾康分析仪通常采用“三分群+光学扩展”或“全光学五分类”策略。在前者中，样本首先经溶血剂处理，溶解红细胞并使白细胞膜结构发生不同程度改变，随后通过流式通道，在鞘流包裹下单个细胞依次通过激光照射区。前向散射光（FSC）反映细胞大小，侧向散射光（SSC）反映细胞内部复杂度（如颗粒性、核形态），结合特定波长的荧光信号（如使用核酸染料SYTO®系列标记DNA/RNA含量），可构建多维散点图，通过预设的门控算法实现五类白细胞的自动区分。例如，中性粒细胞因富含颗粒而呈现高SSC，淋巴细胞则因核质比高而具有特定FSC/SSC比值。

在红细胞与血小板分析方面，仪器通过高分辨率电阻抗通道分别设置不同阈值窗口：红细胞通道通常设定在36–360 fL，而血小板通道为2–30 fL。为避免小红细胞或大血小板造成的交叉干扰，部分型号引入浮动界标（Floating Threshold）技术，动态调整分类边界。此外，网织红细胞检测模块（如AC-9800 Plus）采用荧光染色法，利用噻唑橙（Thiazole Orange）嵌入未成熟红细胞中的残留RNA，在特定激发波长下产生荧光信号，从而实现Ret%（网织红细胞百分比）和IRF（未成熟网织红细胞分数）等参数的精准测定，为骨髓造血功能评估提供关键依据。