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微流控芯片电泳测定产品说明:
背景介绍:
高密度脂蛋白(HDL)根据其密度、大小和组成可分为几个亚组分。越来越多的证据表明,HDL亚组分在动脉粥样硬化的发病机制中具有非常不同的作用。在高密度脂蛋白亚组分的研究中产生不同结果的部分原因是由于对非常小的高密度脂蛋白颗粒(直径5-12纳米)进行检测的技术挑战。有几种不同的方法可用于检测HDL颗粒,如梯度凝胶电泳和核磁共振,但不同方法之间的结果通常不兼容。为此,该研究使用了国盛医学 (ABIOM)的微流控芯片电泳系统,用于快速、准确和自动分离微小的精细HDL亚组分。
高分辨率磁共振成像(HRMRI),一种处理血流和血管壁对比的无创成像技术,作为一种可靠的可视化血管壁形态和病理的成像方法,在无创体内分析中获得了突出的地位。HRMRI突破了传统体内血管检查技术的局限性,为我们提供了有关动脉粥样硬化组成的信息,如炎症、坏死核心的存在和斑块内出血。HRMRI上颅内斑块的异质性增强是斑块不稳定的标志,与有症状的颅内动脉粥样硬化患者近期的缺血事件和卒中复发密切相关。该研究基于HRMRI研究HDL亚组分与颅内大动脉粥样硬化斑块特征之间的关系。
研究方法:
本研究是一项基于中山大学第一附属医院患者的单中心横断面研究。从2020年7月1日至2022年12月31日,该研究招募了连续就诊的患者,这些患者通过计算机断层血管造影(CTA)或磁共振血管造影(MRA)检测到单侧颅内动脉狭窄或闭塞,伴有或不伴有相应症状。所有患者均行常规脑MRI/弥散加权成像(DWI),然后行HRMRI。
根据患者的临床表现(基于美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,这是一种广泛用于衡量卒中严重程度的15项损害量表)以及斑块是否与责任病变在同一侧,将患者分为两组:有症状斑块组和无症状斑块组。
微流控芯片电泳用于HDL亚组分分析
所有HDL亚组分均在广东国盛医学科技有限公司(ABIOM)使用ABIOM的HDL亚组分测定试剂盒和微流控系统(MICEP-30)(中国广州)根据制造商的说明进行检测。通过特定算法分析HDL亚组分的方式,并以HDL-2b和HDL-3的组分百分比报告结果(图1)。
核磁共振成像扫描
病变部位定义为由MCA动脉粥样硬化病变引起的管腔狭窄最严重的水平(图2)。通过血管-脑脊液界面自动计算血管面积(VA)。管腔面积(LA)由血管-血液界面计算。选择斑块最厚的切片来测量直径。壁面积(WA)计算为血管面积减去管腔面积。斑块面积为病变部位的WA减去参考部位的WA。斑块负担计算为斑块面积/病变部位血管面积× 100%。狭窄率公式为(病变部位1-LA /参考部位)× 100%。重构指数(RI)是指病变部位血管面积与参考部位血管面积之比。阳性重构(PR)定义为RI > 1.05;负重构(NR)定义为RI < 0.95;中度重构定义为RI在0.95 ~ 1.05之间。
结果分析
颅内动脉粥样硬化患者的一般特征
患者一般特征的细节,包括人口统计学、临床特征和实验室数据。根据有无临床症状(NIHSS评分)及斑块是否引起临床症状分为有症状斑块组和无症状斑块组。结果显示,有症状斑块患者血清HDL-2b水平显著低于无症状斑块患者。而HDL、HDL-2a 、HDL-3 水平差异无统计学意义。(表1)
HDL变量与症状斑块之间的关系
单因素logistic回归分析显示,白细胞计数、血小板计数、c反应蛋白和HDL-2b 与症状性斑块显著相关(表2)。
在多因素logistic回归模型中评估HDL变量与症状斑块之间的关系。在控制白细胞计数、血小板计数和c反应蛋白后,我们发现HDL-2b水平与症状性斑块呈显著负相关。在进一步调整高血压、糖尿病总胆固醇和低密度脂蛋白后,结果相似。HDL-2a、HDL-3和总HDL水平与完全调整后症状斑块的相关性无统计学意义。(表3)
根据受试者工作特征(ROC)曲线模型分析,HDL-2b预测症状性斑块的截断点(约登指数)为0.21 mmol/L,预测效果最佳。(图3)
低和高HDL-2b水平患者的斑块特征
在HRMRI上,HDL2b < 0.21 mmol/L的患者更容易出现斑块增强和阳性重构。血清HDL-2b水平与斑块负荷和管腔狭窄程度呈负相关。
结论
该研究发现HDL-2b是预测颅内动脉粥样硬化患者症状斑块的潜在独立标志物。随后定量评估斑块模式,发现HDL-2b与HRMRI显示的斑块增强、重构模式、斑块负荷和狭窄率密切相关。HDL-2b < 0.21 mmol/L的患者在HRMRI上更容易出现斑块增强,且斑块负担更大,狭窄率更高,更容易出现阳性重构。
参考文献:
[1]Zhezhi D, Zhihui Z, Shifeng Z, et al. HDL subfractions determined by microfluidic chip electrophoresis predict the vulnerability of intracranial plaque: A HRMRI study[J]. Clinica Chimica Acta, 2023: 117713.
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